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            B95-8絨猴EBV轉化的白細胞
            點擊次數(shù):1482 更新時間:2015-03-25


            細胞名稱          B95-8絨猴EBV轉化的白細胞 

            種屬            絨猴 

            組織來源          外周血 

            生長狀態(tài)          懸浮細胞 

            培養(yǎng)條件          培養(yǎng)基類型:RPMI1640培養(yǎng)基 

                          FBS:10% 

                          抗生素:雙抗 

                          培養(yǎng)條件:37℃,CO2:5% 


            傳代方法          收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài): 

                              如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮 

                          培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。 

                              如果細胞已經長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。 

                          貼壁細胞傳代方法: 

                          1棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。 

                          2加1ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細胞接觸 

                          后放入37℃培養(yǎng)箱內,隨時觀察細胞狀態(tài)變化,待細胞大部分變 

                          圓后加*培養(yǎng)基終止消化。 

                          懸浮細胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。 

                          1直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3, 

                          吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù) 

                          培養(yǎng)。 

                          2離心法傳代是將細胞連同培養(yǎng)液一并轉移到離心管內,1000rpm, 

                          5分鐘,去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內,吹打細胞形成細胞 

                          懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。 

                           一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。 

            凍存方法          70%*培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。 

                          儲存:液氮中長期保存。 

            注             1觀察細胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。 

                          2在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落,可 

                          離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。 

                          3收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等,請在一周內與我們 

                          。

            滬公網安備 31011802001676號

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