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            RNA純化試劑盒操作步驟
            點擊次數(shù):1291 更新時間:2022-07-19

              

             

             

            RNA純化試劑盒說明書

            RNA Cleanup Kit

            RNA純化試劑盒

             

            Cat. No.   K0589

            保存:室溫

             

            組分說明

             

             

                                                        Catalog no.             K0589

                                                          Kit Size                 20

                                                         Buffer RL               20 ml

                                                Buffer RW2concentrate)          11 ml

                                                    RNase-Free Water             10 ml

                                                      Spin Column RS               20

                                                 Collection Tube1.5 ml)           20

                                                 Collection Tube2 ml)             20

             

             

            產(chǎn)品簡介

             

                本試劑盒使用*的離心吸附柱,在高鹽條件下 RNA 與硅基質(zhì)膜高效、專一地結(jié)合,適用于從酶促反應(yīng)及其他多種方法提取的 RNA 溶液中進一步純化和濃縮 RNA,并將 RNA 樣品進行脫鹽處理,有效回收得到高純度的 RNA。該試劑盒最小可以將 RNA 樣品濃縮至 30-50 µl,回收得到的 RNA 可直接用于微點陣分析和 Real-time PCR 等敏感實驗。

            注意事項

             

            1.  預(yù)防RNase污染,應(yīng)注意以下幾方面:

             

            1)使用無RNase的塑料制品和槍頭,避免交叉污染。

             

            2)玻璃器皿應(yīng)在使用前于180℃高溫下干烤4小時,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分鐘,用水*沖洗后高壓滅菌。

            3)配制溶液應(yīng)使用無RNase的水。

             

            4)操作人員戴一次性口罩和手套,實驗過程中要勤換手套。

             

            2.  第一次使用前應(yīng)按照試劑瓶標簽的說明先在 Buffer RW2 中加入無水乙醇。

            3.  Buffer RL 如果產(chǎn)生沉淀,請加熱使其溶解后放置。

             

            4.  所有離心步驟均在室溫下進行,且所有操作步驟動作要迅速。

             

            自備試劑:無水乙醇(新開封或提取RNA專用)  

             

             

            操作步驟

             

             1.  RNA-Free Water 調(diào)整樣品至總體積至 100  μl,加入 350 μl Buffer RL,充分混勻。

             

             2.  加入 250  μl  無水乙醇,混勻。

             

             3.  將得到的溶液700  μl轉(zhuǎn)移到吸附柱(Spin Column RS)中(吸附柱已裝入收集管 2 ml Collection Tube  中),10,000rpm~11,500 x g)離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

             

             4.  向吸附柱中加入500  μl Buffer  RW2(用前檢查已加入無水乙醇), 10,000 rpm  離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

             

             5.  重復(fù)步驟4

             

             6.  將吸附柱放回收集管中,12,000 rpm離心1分鐘。

             

             7.  將吸附柱裝入新的RNase-Free 1.5ml收集管中,向吸附膜的中間部位加入30-50  μl RNase-Free Water,室溫放置1分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,得到的RNA溶液保存在-70℃,防止降解。

             

                 注意:  RNase-Free Water最好在70℃預(yù)熱,確保RNA洗脫充分;洗脫體積不應(yīng)小于30 μl,體積過小影響回收率。

            2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域生物醫(yī)學(xué)實驗外包及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

            如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

             

            實驗代做服務(wù):

             


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